徕卡显微镜在生物荧光的应用

徕卡显微镜推出了正置荧光显微镜和倒置荧光显微镜、荧光体视显微镜，这类显微镜主要应用于生物荧光的研究，生物荧光成像原理研究。本文将简单介绍徕卡显微镜在生物荧光的应用。

荧光是生物和分析显微镜中最常用的物理现象之一，主要是因为它具有灵敏度高、特异性强的特点。荧光是冷发光的一种形式。

正置荧光显微镜甚至允许用户决定单个分子种类的分布、数量及其在细胞内的位置。可以实现共区域化和相互作用的研究，离子浓度以及观察细胞内间的胞吞和胞吐过程。

借助超分辨率荧光显微镜，甚至可以成像亚分辨率结构。

请前往Science Lab阅读更多关于正置荧光显微镜、定量荧光技术和超高分辨率显微技术的文章。

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荧光显微镜

用于研究应用的荧光显微镜和倒置荧光显微镜都是基于一套光学滤光片而工作：

• 一个激发滤光片

• 一个分束片

• 一个发射滤光片

这些过滤片通常是一起插在滤光块（复合显微镜）或在一个扁平的盛放器（主要是立体显微镜）中。

激发滤光片会选择波长来激发标本内一个特定的染料，发射滤光片作为一种质量控制，只让特定的荧光团发射的波长通过。二向分色镜是用来反射激发带中的光并在发射带中传递光，从而产生经典的荧光入射光。

这个荧光教程解释了光路中光学元件和正置荧光显微镜的工作模式，例如可用于透射光对比法的荧光显微镜和倒置荧光显微镜。

荧光立体显微镜

徕卡显微系统的荧光体视显微镜使用TripleBeam技术，一个无二向分色镜的样品的单独的（第三）荧光照明光路。

因此，需要一个用于照明光束路径的激发滤光片，两个发射滤光片，各用于观察光束路径.

用于荧光显微镜的摄像头

为了获得荧光图像，必须使用合适的CCD或sCMOS荧光摄像头。徕卡显微系统为所有应用需求提供专用荧光摄像头。每个显微镜摄像头都提供了良好的灵敏度与图像质量的结合，以确保优质的结果

用于荧光显微镜的软件

在正置荧光显微镜中，直观的设置和实验控制变得越来越重要。专用的Leica Application Suite (LAS) X 软件平台有助于建立更加复杂的实验。LAS X从实验建立起一直引导您到成像数据的分析。从简单的多通道实验到复杂的三维分析，LAS X是您优质的软件平台。

Leica M205 FA 和 Leica M205 FCA

(半) 自动荧光体视显微镜 Leica M205 FA 和 Leica M205 FCA

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分子生物学和细胞遗传学研究中，在早期阶段观察转基因的表达和选择合适的研究样本非常重要。这也是为什么您需要一台成像亮度高且大范围变倍的体视显微镜的原因，因为它可以让您快速且准确地发现目标。现在，Leica M205 FCA荧光体视显微镜集两种优势合于一身，在快速筛选的同时呈现高质量、清晰明亮的图像。

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当您试图寻找越来越微弱的荧光信号时，是否有时会有种在夜里钓鱼的感觉？明亮的高分辨率图像是现代发育生物学和研究的必备。徕卡显微系统开发的 M205 FA 和 M205 FCA 荧光体视显微镜，可让您在早期轻松检测 GFP 和 mCherry 等转基因表达，从而选出合适的样品，为您的成功奠定基础。过去，您可能不得不在两个系统之间来回切换：一个可手动缩放，筛选快速，操作直观，另一个是可观察和采集图像中微弱信号的高端解决方案。 Leica M205 FCA 荧光体视显微镜将两个系统合二为一，组成具有高端成像能力、超级快速的手动筛选显微镜。

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荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成及其微环境。

FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或微环境的信息。FLIM的典型应用是FLIM-FRET。FRET是研究分子相互作用的成熟技术。它能用来研究蛋白质结合并在埃的尺度上估算分子间的距离。