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STED样本制备指南

本指南适用于配备有589/592、660和775纳米STED激光以及STEDWHITE物镜的STELLARIS STED和STELLARIS 8STED显微镜。

受激发射损耗(STED)纳米显微镜技术彻底改变了生命科学领域,将分辨率降低到了低于共聚焦显微镜的衍射极限,并具有分子特异性。STED建立在共聚焦系统之上,用激发光和环形STED光同时扫描样本。通过这种方式,荧光团通过受激辐射返回到基态,有效观察体积小于衍射限制的共聚焦体积。

STED纳米显微镜可以在二维空间(通过涡旋相位产生环形光束)工作,也可以在三维空间(将涡旋相位与z相位掩膜相结合)工作。

使用STELLARIS STED或STELLARIS 8 STED:

>使用涡旋环形光束,可以实现的横向分辨率低于50纳米(通常为30-40nm,取决于样本和荧光团):

>共聚焦光学切片技术自然存在。结合高端STED WHITE物镜,可以对样本内部深处(例如组织)的3D结构进行成像:

>通过将涡旋相位与z相位掩膜相结合,可以将轴向分辨率降低到130纳米以下(通常为100nm,取决于样本和荧光团):

>可以根据应用需求,在三个维度上调整分辨率:

>可以实现快速图像采集(每秒采集多张图像):

>由于高度灵敏的HyD光谱探测器,可以使用荧光蛋白或其他荧光标记进行活细胞纳米成像:

>得益于三种不同的STED激光器(589、660和775纳米)和白光激光器(WLL)用于激发的光谱灵活性,可对一系列适合的荧光团进行成像。

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