2020年6月19日，激光共聚焦新品STELLARIS上市（上海站）暨华东区用户交流会在中国科学院上海学术交流中心隆重召开。在众多方法学并存的今天，以影像科学为基础的科学研究迸发出蓬勃生机。本次会议围绕显微技术在基础医学、临床医学、植物学等多学科中的应用成果展开讨论，并实操体验STELLARIS和THUNDER系列产品在诸多研究领域的应用。
开幕式上，生命科学市场经理李伟晶对各位专家的莅临表示了欢迎，回顾历史，徕卡始终秉持以前沿科技为导向，实现应用转化，以助力用户推动科学发展。应用团队为STELLARIS揭开神秘面纱，向与会的专家们介绍了产品的性能与应用，并通过分组操作的方式让专家们亲身感受革命性升级带来的全新体验。
▲应用团队为STELLARIS揭幕
▲与会人员上机感受STELLARIS
会上诸多徕卡的资深用户分享了自己的研究成果与心得体会，我们一起来回顾下吧。
讲题一：血脑屏障胞转机制管状结构的超分辨研究
报告人：田肖和 安徽大学生命科学学院
田教授介绍了课题组通过荧光纳米探针揭示血脑屏障胞转机制。从纳米颗粒的制备到表面修饰分子Angiopep2浓度的优化，从生物物理学模型分析到“三明治样”3D细胞模型的设计，每一个环节都建立在稳定的实验平台基础上。研究人员发现大分子透过血脑屏障的转运受到受体浓度的调节，且需Syndepin II的协助才能高效完成。田教授利用Leica共聚焦的共振扫描技术初步验证了这一假说，利用4D STED技术进一步捕捉到分子通过血脑屏障的实时超分辨影像学信息，并分享了他在STED荧光染料优化环节上的宝贵经验，向我们展示了高水平的神经生物学和纳米示踪技术的超分辨研究。
▲田教授分享其在STED荧光染料优化环节上的宝贵经验
讲题二：体外细胞微环境重构及生物学行为研究
报告人：刘妍君 复旦大学生物医学研究院
刘教授课题组结合微流控技术及分析化学的方法，重构体内细胞微环境，研究细胞运动、迁移等生命现象。通过与Leica合作共同搭建的全自动活细胞动态跟踪影像平台，实验者可轻松追踪长达数天的活细胞行为，并能保证长时间成像过程中焦面的稳定及细胞的活性。研究者发现细胞在体外重构的不同微环境中可在EMT与Amoeba运动间灵活切换，这为体内肿瘤细胞转移及侵袭机制的研究提供了新思路，有望为肿瘤精准治疗提供新方向。
▲刘教授分享其实验平台
讲题三：FLIM在无标记癌症诊断和纳米材料中的应用
报告人：糜兰 复旦大学光科学与工程系
FLIM技术具有对微环境的PH值、蛋白结合态、氧、钙离子浓度等敏感，不受样品浓度、激发光强度、光漂白等的影响等特点。研究人员发现由于代谢的不同，癌变区域的自发荧光寿命比较短。在常规肿瘤病理诊断中组织化学石蜡切片需要7天，冰冻切片HE染色需要30min，而FLIM方法只需要2~3min。在对肺癌与宫颈癌患者的样本分析中发现，荧光寿命的差异具有统计学意义，且能在组织发生可观测形变前对肿瘤进行早期诊断。
▲FLIM成像下，肿瘤组织的自发荧光寿命短于正常组织，正常组织、移行区和癌变区的边界明显
此外，FLIM还可用于细胞内PH探测。细胞内pH对细胞增殖、凋亡、离子转运、内吞、肿瘤生长等至关重要，异常的pH与肿瘤、阿尔茨海默症等相关。pH传感CDs纳米粒子，在不同PH值溶液中，不仅荧光亮度变化，荧光寿命也会变化，而且更加线性，更加稳定。能应用在活细胞中，与其他荧光染料共染。
▲CDs在活细胞中的FLIM成像
讲题四：FLIM-FRET技术验证植物自噬相关蛋白互作
报告人：管彬 中科院分子植物卓越创新中心
烟草表皮细胞中瞬时表达细胞自噬相关膜蛋白X-GFP和Y-mCherry，研究人员利用门控技术有效去除烟草细胞壁的自发荧光和杂散光。在只表达X-GFP和表达free-GFP/Y-mCherry的对照组中测得Donor GFP的的荧光寿命为2.75ns左右，而在同时表达X-GFP和Y-mCherry的实验组中测得GFP的荧光寿命下降至2.6ns左右，统计学分析显示X蛋白与Y蛋白有显著的FRET现象。
讲题五：多功能荧光聚合物纳米探针用于淋巴管系统结构与功能的多尺度多模态成像
报告人：熊丽琴 上海交通大学
淋巴管与肿瘤的复发转移息息相关，但目前对其生理过程研究较少。熊教授构建了性能稳定、更快速的淋巴管靶向显影及载药的多功能纳米探针，标记小鼠淋巴系统，再利用Leica多光子、高分辨、大深度成像系统观察，发展了淋巴管系统活体高分辨成像的新方法。该方法实现了术中快速成像，准确定位，区别正常淋巴结与肿瘤浸润淋巴结的位置，帮助医生精准手术切除，而无需淋巴结清扫，减少手术并发症，提高患者生活质量。
▲熊老师为大家带来精彩报告
讲题六：STED揭示了纤毛中央微管的形成机制
报告人：刘浩 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
纤毛的运动对很多器官正常生理功能起重要作用，而中央微管是纤毛运动的重要组成部分。研究发现Wdr47蛋白表达会随着纤毛生长而递增，同时Wdr47蛋白会在肺和脑等多纤毛组织器官中高表达。为了研究Wdr47蛋白在纤毛中扮演的角色，使用Leica STED超高分辨成像技术观察Wdr47蛋白在纤毛中的定位。结果显示，STED技术可以有效分辨Wdr47在微管上的定位情况，同时，Wdr47与中央微管有很好的共定位。
此次会议内容精彩纷呈，气氛热烈活泼，与会人员收获满满，一天的会议时长尤嫌不足。期待疫情早日结束，下一站的会议可以与更多老师相聚，为大家带来更多的前沿分享。
