病毒分离好助手—DMi 1

新冠未平，猴痘又起，2019年底的新冠已经肆虐2年多了，还未结束，新的一场潜在流行又开始若隐若现，这就是猴痘病毒。

猴痘是痘病毒科正痘病毒属的一种。猴痘是一种罕见的病毒性人畜共患病（从动物传播给人的病毒），病人症状与过去在天花病人身上所观察到的相似，但临床严重程度较轻。随着在1980年消灭了天花和随后停止接种天花疫苗，猴痘成为最严重的正痘病毒。¹在非洲中部和西部地区热带雨林仍有猴痘散发病例。在沉寂了多年之后，在2022年初猴痘病毒再次进入到大家的视野。具路透财经早报报道，世界卫生组织(WHO)周五召开紧急会议，讨论最近爆发的猴痘疫情，此前欧洲公布有100多例确诊或疑似病例。德国称这是欧洲有史以来最大的猴痘疫情，至少有九个欧洲国家－比利时、法国、德国、意大利、荷兰、葡萄牙、西班牙、瑞典和英国－以及美国、加拿大和澳大利亚报告了病例。世卫组织称，科学家们正在对不同病例的病毒进行研究，看看它们是否有关联，预计将很快提供最新消息。²

而对病毒进行研究首先需要对病毒分离，分离的常见方法是将从病人处取样后的病毒感染宿主，其可以是动物、鸡胚或细胞株，而较之前二者的成本、生长环境的复杂性和易用性，细胞株现在是最常用的宿主。

以新冠病毒的分离为例，将状态良好的Vero E6和Huh-7细胞分别接种于96孔细胞培养板，培养24 h后备用。冻存的鼻/咽拭子标本放置于冰上升温而融化。弃96孔细胞培养板中培养液，每孔加入标本液25 μL；每个标本分别接种2类细胞系。另外，每个细胞系设2个对照孔，每孔仅加入25 μL维持液。将接种好的细胞培养板于5% CO2、37 ℃培养箱中孵育2 h。然后弃接种的标本液，每孔加入100 μL DMEM维持液, 放置5% CO2、37 ℃培养箱中继续培养，每日观察细胞病变。如有细胞病变，则在80%以上细胞单层被破坏时，收取细胞培养物。对没有出现的病变细胞，收取上清液，按类似方法盲传2代，并对细胞培养物进行实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，荧光定量RT-PCR)检测还可以利用反转录酶合成cDNA后进行测序。³

在对细胞进行培养和感染过程中需要对活细胞的状态快速检验，确保在合适的时机进行传代和收获病变的细胞。而在此用途的睿智之选就是徕卡显微系统的 DMi1倒置显微镜。首先其可以灵活地切换S40聚光镜（40-50mm工作距离）和S80聚光镜（80mm工作距离）。其次，高品质的徕卡物镜，提供色彩鲜明的图像。再次，深思熟虑的设计以及质量控制元件，使用者即使面对冗长的工作，仍然可以舒适地工作。在其做相衬观察时，使 用 简 便， 只 需 轻松旋转物镜转换盘，即可在10x至20x至40x相衬之间切换。无需改变相衬插板中的相衬环——PH1相衬环匹配全部三种物镜！且智能功能使的工作流程顺畅、高效，节省了时间和资源。最后，徕卡显微系统的高品质成像技术提供精准的结果，降低出错的风险。显微镜的LED照明意味着低能源成本以及最小的停工时间。无需经常更换灯泡，或等待达到合适的色温。除了上述介绍的光学和机械设计，DMi1还有相机版本，其是图像采集和细胞培养存档的一体式解决方案。您可以在250万或500万像素分辨率之间选择。机安装在支架背面。无需额外的三目镜筒，可获清晰视图及轻松进入工作区域。使用遥控采集图像甚至视频。数据直接存储在SD卡上，无需使用电脑。相机可连接任意HDMI显示器，与同事或学生一起进行讨论。HDMI端口可在屏幕上提供优质的图像。若需要测量和批注，提炼图像分析，系统中包含用于PC的徕卡应用套件（LAS）软件的核心版本可以完成此项工作。DMi1还是在中国生产的具有百年德国光学传承的产品，兼顾品质和成本优势，为了方便临床使用还专门有医疗器械注册证：沪械注准20202220450。

2019-2022在接连的各种高传染力的病毒轮番上阵之时，徕卡显微系统有专门的解决方案为病毒的研究保驾护航。