紫外线刺激防晒霜的Cryo-SEM分析

光刺激下的高压冷冻

EM ICE是唯一将光刺激与快速冷冻固定相结合的高压冷冻设备,也是神经生物学研究中使用最多的一种光遗传学方法。但这种方法对于制药或化妆品行业也非常值得研究,可用来深入了解UV(紫外线)照射对其目标结构的影响。本文举例说明UV(紫外线)照射对防晒霜超微结构的影响。

作者

  • Dietmar Pum博士1 ●Saskia Mimietz-Oeckler博士2
  • 奥地利维也纳自然资源和生命科学大学应用遗传学和细胞生物学研究所(IAGZ)
  • 徕卡显微系统

主题与标签

Cryo SEM    高压冷冻

高压冷冻

将防晒霜*小心地涂抹在3 mm镀铜/镀金载体的100 μm切口上,再盖上3 mm的蓝宝石圆盘。使用Leica EM ICE对防晒霜样本进行高压冷冻,然后在没有光刺激的情况下再次高压冷冻。实际冷冻之前,光刺激样本在UV(紫外线)光照下曝光500毫秒(连续曝光)。

实验细节

光刺激强度(mW/mm2)(同一样本表面上)                       6.0

LED颜色:                                                                             UV(紫外线)

LED波长(nm)                                                                    385

周期(ms)(实验总持续时间)                                           500

脉冲(ms)(暴露于光刺激下)                                           500

转移、镀膜和SEM

在一个预冷的Leica EM VCM冷冻工作站中,将3mm样品托和蓝宝石片与冷冻后的样品形成的三明治结构固定在一个通用型样品台上,然后通过Leica EM VCT500传输杆将样品台传输进Leica EM ACE600中。样品在-110℃下(等待10分钟后),用压裂刀将蓝宝石圆盘(顶面)剥离样本进行压裂。

接下来在-100℃下对样品进行部分升华(保持15秒)再溅射2nm厚度铂金膜。然后使用Leica EM VCT500传输杆将样品转移到FEI Inspect S50扫描电子显微镜(SEM)的Leica EM VCT500 低温冷冻台上,传输过程中Leica EM VCT500传输杆可将样品保持在高真空条件并主动冷却。在-120℃(高强度:30kV)下获得二次电子图像。

图1:无UV(紫外线)曝光的防晒霜高压冷冻


结果

防晒霜结构通常都能够吸收高能紫外线并以低能射线的形式释放能量。UV(紫外线)衰减效力取决于无机颗粒的粒径、有机成分的性质以及各成分的具体比例。这种构成上的特异性将决定防晒系统对UV(紫外线)的吸收和散射比率。图像中描述了防晒霜样本在UV(紫外线)下曝光500毫秒后的结构变化,并与未经UV(紫外线)曝光的相同样本进行了比较。

 

图2:UV(紫外线)曝光后5秒的防晒霜高压冷冻

样品制备于2015年5月由奥地利维也纳徕卡显微系统公司的Cveta Tomova博士和Saskia Mimietz-Oeckler博士负责完成。图片由奥地利维也纳自然资源和生命科学大学Dietmar Pum教授于2015年5月拍摄。

*产品的商标和SPF(防晒系数)有意不予提及。

相关文章

Brief Introduction to Freeze Fracture and Etching(冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍)

High Pressure Freezing with Light Stimulation(光刺激下的高压冷冻)

Commercially Available Hand Creams - Sample Preparation for Cryo-SEM(商用护手霜 – Cryo-SEM的样本制备)


提交后,我们将每月自动将您关注领域的行业快讯更新链接通过短信、邮件发送给你
内容订阅
提交后,我们将每月自动将您关注领域的行业快讯更新链接通过短信、邮件发送给你
您提交上述资料视为您同意我们收集、使用上述信息,我们会妥善保存您提供的信息。点击阅读 徕卡隐私协议

相关产品


Leica EM ICE 高压冷冻仪                                          Leica EM ACE600高真空镀膜仪


紫外线刺激防晒霜的Cryo-SEM分析 立即观看
RELATED PRODUCTS
相关产品
玻璃化冷冻结构对环境影响极其敏感,需要对其加以保护以免形成假象。在理想条件下制备用于详细图像评估的样品: 在样品周围采取冷屏蔽措施,避免水分子在样品上冻结 在整个过程中精确控制温度 清洁的刀具 – 每次切片均使用干净的刀片,避免污染 及时、迅速的电子束镀膜,捕获详细的表面信息 在受保护的真空状态下转移到其他分析系统
为SEM和TEM分析生产同质和导电的金属或碳涂层,之前从未有过比与Leica EM ACE200涂层系统更方便的设备了。 配置为溅射镀膜机或碳丝蒸发镀膜机后,可以在全自动化系统中获得可重复的结果,实现了一台EM ACE200具有喷金仪,喷碳仪,蒸镀仪三种功能。如果您的分析需要这两种方法,徕卡显微系统在一台仪器中提供可互换机头的组合仪表。
Leica EM AC20超薄切片自动染色机最大程度减少用户接触有毒试剂的机会,并有效节省试剂消耗。 仪器采用蠕动泵和非接触式阀门设计,试剂直接从管路系统进入样品仓,快速高质量双染色,维护简单。
Leica EM KMR3 采用平衡断裂法,确保制备出优质的玻璃刀,有三种规格玻璃条可供选择:6.4mm,8mm,10mm。 简单易用 Leica EM KMR3简单易用,当断裂完成,压力旋钮和切割滚轮可自动复位,防止误操作。
wechat
欢迎扫码关注徕卡官方微信,更多显微技巧,行业资讯尽在掌握
close