活动回顾 | 第二届徕卡南方科技大学冷冻电镜制样培训班在南方科技大学成功举办

5月9-11日，由南方科技大学冷冻电镜中心与徕卡显微系统（上海）贸易有限公司联合举办的第二届冷冻电镜制样培训班在南方科技大学成功举行。来自南方科大、北大、南通大学、中科院生物物理所等单位的8名专家进行报告交流，来自全国20余家高校、科研院所、企事业单位的技术代表参加了本次培训班。徕卡显微系统的产品经理王仁姚主持会议。

5月9日

进行了全天的线下会议

南方科技大学冷冻电镜中心王培毅教授致欢迎辞，热情的欢迎各位专家的到来，充分肯定了之前培训班的成效，还向参会专家介绍了南方科技大学冷冻电镜中心的概况并对冷冻电镜技术的进展做了简要阐述。

徕卡显微系统中国区总监吴长发先生致辞，对南方科技大学冷冻电镜中心对本次活动的大力协助与支持表示衷心感谢！徕卡170多年来始终致力于推动显微成像的技术进步与创新，突破视觉极限，发现真相。吴长发先生还对徕卡助力中国基础科学与生命科学研究寄语，希望徕卡与南方科技大学冷冻电镜中心合作共赢，希望通过培训班交流会使电镜技术得到进一步提升，对未来技术发展持续贡献力量。

南方科技大学/同济大学的祝建教授介绍和举例高压冷冻及冷冻替代技术在电镜制样中的应用。高压冷冻可以迅速转移样品的热量，降低水的冰点，抑制冰晶成核和冰晶生长，固定较大的（200 µ）含有水分的组织样品，保证样品中的水分以玻璃化状态存在的，较好地保存了细胞、组织真实的超微结构。冷冻替代技术是高压冷冻固定后向常温技术过度的一种必不可少的脱水技术。其优点是脱水慢，减少细胞变形和膜结构的抽提等，在低温—常温的脱水过程中对样品进行二次固定（在常温下维持高压冷冻固定的结构），最大限度地保持细胞超微结构的真实性。二种技术可以很好地与常规电镜生物样品制备相结合，具有广泛的应用前景。还简要报告了高冷冷冻技术与Tokuyasu、冷冻超薄切片技术结合的优势。

中科院生物物理所成像中心的高级工程师孙磊介绍了原位电镜冷冻制样。报告了高压冷冻、冷冻含水切片等技术原理、操作和实验技巧，还与大家分享了自己的制样经验和注意事项。

北京大学生命科学学院公共仪器中心的高级工程师胡迎春根据自己开展Tokuyasu冷冻超薄切片免疫标记技术的经历，结合实例，从原理、制样方法、标记步骤等方面为我们详细介绍了此技术。

来自徕卡的南希为我们报告了基于人工智能的Aivia软件，通过构建一个二维至五维的图像可视化、分析与数据诠释完整平台，使之能够在几分钟内可靠地处理和重建高度复杂的图像。对于深入挖掘电镜数据有着重要的意义。

南通大学特种医学研究院的李霞教授为我们介绍了通过冷冻电子断层扫描对哺乳动物完整细胞进行高分辨率成像。报告提出了基于神经生长因子分化适合于细胞器和分子的高分辨率原位成像的PC12+的模型系统，还详细介绍了一种优化的成像系统，该系统有效地结合了CLEM、Cryo-FBI、Cryo-ET等，以接近天然细胞环境中确定细胞三维结构。研究表明，PC12+系统的Cryo-ET成像为以高分辨率解剖哺乳动物细胞中的特定细胞过程提供了一种可及且高效的途径。

南方科技大学冷冻电镜中心技术主管马晓旻为我们介绍了冲入式冷冻制样技术的原理、操作注意要点和实验技巧，为我们利用单颗粒冷冻电镜技术以解析大型动态蛋白质结构解决了基础知识进行了解疑。

徕卡共聚焦显微镜产品专家Jan Debock为我们报告了冷冻共聚焦光电联用技术，在会上向我们展示了利用冷冻共聚焦光电联用技术用于评估样品质量、安全的样品转移和低温条件下的超分辨率成像，为精准靶向提供了基础。

徕卡的应用专家邓广杰为我们介绍了激光扫描共聚焦显微系统，简要介绍了一个基于模块化设计的激光共聚焦平台，集成多种功能，提供精确的三维成像及准确的细胞结构及动态过程的成像，是尖端医药研究的理想伙伴。

5月10-11日

进行了上机实操培训

冷冻电镜中心联合徕卡工程师安排了上机实操培训，让大家近距离接触了高压冷冻EM ICE、冷冻传输系统EM VCT500、超薄切片机UC7/FC7、冷冻光电联用CRYO CLEM、投入冷冻EM GP2、共聚焦STELLARIS 5以及人工智能软件AIVIA。通过工程师的实时演示和解释，以及参会师生的现场提问，取得了较好的交流互动效果，为生物成像实验设计和优化、拓展研究思路以及开展合作研究等提供了最直接的技术指导和最直观的展示交流机会。