(半) 自动荧光体视显微镜 Leica M205 FA 和 Leica M205 FCA

当您试图寻找越来越微弱的荧光信号时,是否有时会有种在夜里钓鱼的感觉?明亮的高分辨率图像是现代发育生物学和研究的必备。

Leica Microsystems 开发的 M205 FA 和 M205 FCA 荧光体视显微镜,可让您在早期轻松检测 GFP 和 mCherry 等转基因表达,从而选出合适的样品,为您的成功奠定基础。


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Leica M205 FA硬件介绍和基本操作

独特的 2 合 1 筛选和成像解决方案

在此之前,您可能不得不在两个系统之间来回切换:一个可手动缩放,筛选快速,操作直观,另一个是可观察和采集图像中微弱信号的高端解决方案。

Leica M205 FCA 荧光体视显微镜将两个系统合二为一,组成具有高端成像能力、超级快速的手动筛选显微镜。


现在,一切功能尽在掌控

  • 所有参数始终自动保存,获取的结果极其可靠,可即时发布。
  • 四位编码的滤片转换器,保持工作流程持续不中断。
  • 新增了脚踏开关,可轻松切换滤片,调焦和照明,释放您的双手,让您专注于筛选


带 mCherry 标记的秀丽隐杆线虫咽腔的视频。来源:Martin Gamerdinger 博士,科学项目领导人,分子微生物学系,康斯坦茨大学,德国

探索自动化研究的世界
Leica M205 FA 全自动荧光体视显微镜

Leica M205 FA 开启了荧光显微学研究的新世界,例如,可让您在无菌操作柜中工作

  • 全复消色差1X物镜,电动连续变倍范围7.8x-160x
  • 可读取实时放大倍数,实现数字实时准确定标测微尺
  • 轻松处理复杂的多通道荧光成像过程
  • 变倍、荧光滤片转换、荧光强度(5级)和可变光阑,都可电动调节
  • 获取载物台级高分辨率:Leica LMT 260 扫描载物台可以亚微米级精度放置您的样品,固定生命细胞培养装置


明亮的荧光信号 – 始终如一

要检测微弱的样品信号,您需要大能量荧光激发光来发出明亮的荧光染料信号。但荧光激发光可能引起反射,导致黑色背景模糊,妨碍荧光信号的检测。

徕卡的三光路技术 三光路技术引入了第三个光学变倍,可完全消除这种背景“噪声”。它将荧光激发光与两个观察通道隔离开来,无需使用分色镜。由此,便可以在无噪声的黑色背景上得到清晰强烈的荧光信号。

阅读 Leica Science Lab 三光路技术的更多信息。


精细的三维细节

您是否认为在显微学中,高分辨率和高景深是不可调和的一对矛盾?我们用事实证明并非如此!Leica Microsystem 的 FusionOptics 融合光学技术 将两条光路用于不同任务,克服了光学限制: 

  • 右侧通道以尽可能大的数值孔径提供高清晰度图像
  • 左侧通道以高景深呈现图像

结果:您将看到细节非常丰富,同时又有极大景深的图像

阅读 Leica Science Lab 的 FusionOptics 融合光学的更多信息


Neuronal cell culture stained with DAPI, beta III Tubulin–Cy2, Nestin-Cy3 (LMS Bioanalytik GmbH, Magdeburg, Germany). Blue indicates the nuclei of the cells, green neurons expressing beta III Tubulin, and red stem cells expressing Nestin. Image was acquired with a M205 FCA stereo microscope, LMT260 x/y stage, DFC3000 G microscope camera and Fluocombi III at 400x.

体视显微镜的分辨率

辨认细微结构在研究中至关重要,特别是处理小生物体时。根据数字分辨率标准 ISO18221,Leica M205 FA 和 M205 FCA 可实现高达 1279 lp/mm 或 0.78 um (0dB 截止频率) 的分辨率。
2.0x PlanApo 物镜是一件光学杰作。它的最大孔径高达 0.35 – 这是迄今为止体视显微镜所能实现的较大数值孔径 (NA)。它比人类红血球直径的十分之一还要小。


速度是关键 – 编码来助力

图像编码提供方便、可复制的设置,轻松快速实现归档。

集成编码可将可变光阑的放大倍率和位置实时传送给软件。刻度条以透明方式叠加在实时图像中,在放大倍率发生变化时同步更新。当保存图像时,所有设置随图像一起保存,您可随时调用。

  • 编码组件提供简单易用、可靠的结果,即使未经过培训的操作者也能轻松掌握
  • 显微镜系统智能链接到软件,无需手动调节校准,轻松更改设置
  • TL5000 Ergo 透射光底座可根据放大倍数自动适配孔径,提供理想对比度


Zebrafish, mpx:eGFP line: time lapse images of the neutrophils to the tail resection. Courtesy of Dr Carl Tucker, The Queen’s Medical Research Institute, University Edinburgh, United Kingdom. In this in vivo model the inflammatory response in a transgenic zebrafish line that expresses GFP under the neutrophil-specific myeloperoxidase promoter is shown. “Quantitative data can be generated from this model by counting of fluorescent cells or by digital image analysis” (Renshaw et al Blood 2006) DOI 10.1182/blood-2006-05-024075

2x CORR 物镜 – 无与伦比的清晰度

使用 Leica PLAN APO 2.0x CORR 物镜,轻松调节折射率 – 即使样品和物镜之间有 5 mm 的水柱,也能得到锐利图像。物镜让水如同无物,方便用户观察和归档样品。

当观察浸没在水溶液中的样品时,结构容易变得模糊,特别是在高放大倍率下。这是因为空气 (折射率 = 1) 与水 (折射率 = 1.3) 的折射率不匹配。由于常规物镜通常只用于被空气包围的样品,而在水溶液中可能发生球面像差,潜在的关注结构或重要结构容易被误读。


Fluorescence video imaging of a zebrafish larva expressing green fluorescent protein (GFP) immersed in an aqueous solution. The images were captured with a Leica M165 FC stereo microscope where a Leica 2x Plan Apo objective with (right image) and without (left image) correction collar was used. The heart of the zebrafish larva is seen beating in both videos. The larva appears blurrier in the non-corrected image on the right. Courtesy of M. J. Hamm and W. Herzog, Angiogenesis Laboratory, Max Planck Institute for Molecular Biomedicine and Westfälische Wilhelms University in Münster, Germany.

探索 LAS X 软件在生命科学中的应用

LAS X 是所有徕卡显微镜解决方案的软件平台。让运行复杂荧光实验变得简单。LAS X (注意:新 LSR 用 LAS X 的网页链接) 将指导您逐步完成整个分析工作流程。

  • 实时数据模式:设计实验模式,控制实验环境
  • 景深扩展 (ED(O)F)
  • 将反卷积的 Z 轴堆叠与 XY 组合在一起,创建大概览图像


Solea senegalensis larvae nervous system, max projection of a tile scan of 6 fields x 33 planes. Parallax correction and tiling performed in LAS X after deconvolution with Huygens professional. Courtesy of Dr. Marco A. Campinho, CCMAR - Centre for Marine Sciences, Universidade do Algarve, Portugal.
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