采访Penelope Zorzi
病理学家使用显微镜检查样本以发现组织和体液中存在的异常。他们的检查发现或推论对治疗决策有非常大的影响。Penelope Zorzi博士拥有免疫学、病理学和基因组学专业背景,是徕卡显微系统健康与临床显微镜术产品工作流经理。她了解病理学家的工作职责并介绍了医生、科学家和病理学实验室化验员的工作。
Penelope Zorzi博士是徕卡显微系统健康与临床显微镜术产品工作流程经理。她拥有意大利维罗纳大学的生物医药科学博士学位,并在美国西雅图华盛顿大学完成了博士后学习。她作为研究科学家和项目经理在免疫学、病理学和基因组学领域拥有长达十年的专业经验。首次接触肿瘤免疫治疗药物领域以后,她决定进入营销和销售领域,并在意大利米兰接受了数字化营销方面的培训,还在美国加利福尼亚州斯坦福大学学习了数据驱动营销。最近几年,她获得了西雅图产品学院的产品管理认证,参加了数据科学训练营,并担任了设计和建筑材料产品管理方面的职位。目前,Zorzi博士任职于徕卡显微系统应用业务单元,提供产品开发协作,并负责就内外部目标群体痛点和需求提供市场洞察和行业知识。
病理学家面对的最大挑战是什么?
Zorzi博士:诊断时间在临床病理学检查中至关重要。你可以想象下手术过程中的组织学分析。手术期间,医生会从患者身上采集活组织切片,然后病理学家会检查由此制作的冷冻组织切片。病理学家的诊断结果会直接影响外科医生下一步的操作。
图1:多头显微镜
这是一项重大的责任。
Zorzi博士:确实如此!诊断结果一定要准确无误。根据我以往的经验,病理学家在工作中对自己的诊断结果极其谨慎,如果有任何疑虑,总是会和同事一起讨论。一些实验室还为此配置了多头显微镜,以便于两个或更多人一起观察样本或摄像头拍摄的图片,这种显微镜在教学中也非常实用。
您能为我们详细介绍下病理学家使用显微镜进行工作的情况吗?
Zorzi博士:病理学家需要观察组织切片和体液,具体视专业情况而定。观察样本时,实验室化验员或病理学家会冷冻或固定样本,例如使用福尔马林,并用冰冻切片机或普通切片机将样本切割为薄片。如果是在显微镜下观察,需要将切片放在载玻片上,染色并盖片。对于体液,大多数情况是涂抹在盖玻片上,然后用盖片盖到载玻片上以防止污染并提高成像质量。
样本取自哪里?
Zorzi博士:样本可以是来自人体的各个部位。组织一般是通过外科手术或活检采集。举例来说,在组织病理学中,会切除痣进行黑色素瘤皮肤癌检查,开展乳房活检进行癌症检查,甚至还可能在术后进行器官活检,例如子宫切除术、结肠切除术或扁桃体切除术。还可能会观察骨头诊断癌症或骨质疏松症等其他骨科疾病。在细胞病理学中,主要是观察细胞。一般是通过组织剥离、刮除或使用细针抽吸。妇科医生还可以通过体液、子宫颈抹片检查获取细胞,肺科专家在诊断癌症或感染时还会提取痰样本。血液病理学家在诊断感染、贫血、凝血障碍和白血病时,会观察全血、淋巴液或骨髓。医学微生物学家会观察微生物诊断感染。
病理学家在观察样本时主要在寻找什么?
Zorzi博士:一般来说,他们会观察与正常组织存在哪些不同。结构、形状、颜色以及细胞数量都可以反映出样本是否存在异常和疾病。
能为我们列举些例子吗?
Zorzi博士:为发现病理变化,通常会使用苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法(简称HE染色法)对组织样本进行染色,细胞病理学样本则主要使用巴氏法进行染色。病理学家可以通过观察染色的吸收和强度情况判断癌症的类型和严重程度,因为组织或细胞的不同部分吸收的颜色也不同。在全血样本中,可以通过观察白细胞数量和它们的形态诊断白血病。
图2:HE染色样本
图3:巴氏法染色(200倍放大倍数)
显微镜如何帮助他们观察到想观察的目标?
Zorzi博士:第一是放大。显微镜可以让人看到肉眼无法看到的更多细节。病理学家一般会使用低倍率快速浏览整个样本,确定目标区域,把载物台移动到那里,然后提高放大倍数进行更详细的观察。
第二个方面是色彩再现和图像清晰度。样本中染色剂的吸收和颜色强度对诊断至关重要,真实的色彩再现和对细胞形态细致入微的成像可以帮助病理学家有效地通过观察得出正确的结论。
第三个方面是使用不同的对比方法观察样本。例如,使用明场观察不同的染色切片。而相差则可以观察到未染色样本的细胞或组织结构。还有其它几种应用于特定分析的对比方法,例如利用偏光可以检测晶体和淀粉样纤维,荧光原位杂交法(FISH)则可用于视觉评估某些DNA改变。
摄像头在病理学中有哪些作用?
Zorzi博士:摄像头正变得越来越重要,尤其是在加快文档处理方面。徕卡为临床病理学提供的显微镜可选配摄像头(特别是K3系列)和支持软件LAS X,病理学家可以借助它拍照并直接在软件中添加注释。他们可以将图像发送给同事,咨询他们的看法,如果没有多头显微镜,或者需要咨询另一家医院或国家的同行,这一特性会非常有用。如果患者有第二个活组织切片需要检查,也可以非常方便地返回到当前图像,而无需取回已经存放的切片。
摄像头是如何与实验室或医院的信息系统协作的?
Zorzi博士:很多摄像头都配有TWAIN驱动器,这个驱动器会将摄像头接入现有的任何信息系统。LAS X软件用于获取图像并进行注释,医生可以通过实验室或医院的信息系统访问图像。
您提到诊断时间是一个至关重要的因素。时间压力和责任对病理学家会有哪些影响?
Zorzi博士:病理学家经常长时间使用显微镜,因此他们会感到疲惫。他们的眼睛、脖子和背部也会出现酸痛的症状,手和胳膊也会因重复性的动作而酸痛,所以一天的工作结束后,他们会有肌肉紧绷的感觉。高工作负荷和高难度的样本观察也会让他们更加疲惫。
实验室环境如何消除这种身体劳损呢?
Zorzi博士:人体工学显微镜会有很大的帮助。如果显微镜能够根据用户的体型进行调整,病理学家便能够以更加舒适的姿势工作。在我去过的实验室中,我看到很多积极的改善。奇怪的是,长期以来,很多病理学家都会选择忍受并不舒服的工作姿势。但是当他们开始会用人体工学设计的显微镜,可以调整目镜的高度和倾斜度,可以通过对称的设置直起肩膀,可以通过调整控制适应左手或右手操作后,他们立刻就感受到了显著的差异,并表示无法想象之前是怎么坚持下来的。
图4:使用人体工学设计的显微镜,操作员能够以更加舒适的姿势工作。
效率在病理学中重要吗?
Zorzi博士:效率非常重要。除了病理学家自身的经验,效率主要是受人体工学和显微镜的设计的影响。这种关系并不明显,但是如果考虑到检查过程中所有琐碎细小的步骤,关系就十分清晰了。例如,以调整放大倍数为例,每次手部移动、每次物镜转盘移动、每次载物台移动都会耗费时间。这些动作所需的时间越短,转盘的移动越流畅,载物台的设置便可以越精确,最终诊断所需的时间也便越短。