冷冻替代的简要介绍
冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程,以避免形成冰晶,并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间,“冷冻”水被有机溶剂溶解,有机溶剂通常也含有化学固定剂[1]。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定(冷冻固定)以及树脂包埋相关联。一旦替代完成,样品会逐渐升温,并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比,成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使在非常低的温度下,大分子在有机溶剂中的聚集和生物分子周围水合膜的变化也可能发生,但可以合理地假设,在低于特定阈值的温度下,FS可以保持水合膜[3,4]。