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徕卡共聚焦课堂第18讲：FLIM FRET和生物传感器——用于生物医学研究的多功能工具
2021年12月24日 16:54
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第18讲：FLIM FRET和生物传感器——用于生物医学研究的多功能工具
荧光寿命成像(FLIM)与荧光共振能量转移(FRET)的结合对生物医学中各种结构元素和细胞动态变化的研究非常有益。FRET可检测分子相互作用，因为FRET信号强烈依赖于两个FRET伙伴的距离。因此FRET可以用来研究分子的相互作用，如配体-受体对、蛋白质-蛋白质相互作用或效应子与DNA的相互作用。另一方面，FRET原理也可用于设计传感器，结合或释放配体时改变探针内两个荧光团的FRET效率。这样的话，我们有两种类型的分子相互作用：传感器中的FRET伙伴以及探针与配体的相互作用。本文解释了分量方法（FLIM和FRET）及其组合如何开拓广泛的应用领域。
徕卡共聚焦课堂第17讲：TauContrast在复杂样品成像领域的优势
2021年12月24日 15:15
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第17讲：TauContrast在复杂样品成像领域的优势
在这次采访中，Timo Zimmermann博士谈到了他在运用TauSense工具方面的经验以及这些工具在研究要求苛刻的样品（例如厚样品或超大胚胎）方面的潜力。作为巴塞罗那基因组调控中心(CRG)高级光学显微镜部门的负责人，Timo Zimmermann博士于2020年在那里测试了STELLARIS 5共聚焦系统。
徕卡共聚焦课堂第16讲：TauSense技术成像工具
2021年12月24日 11:23
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第16讲：TauSense技术成像工具
通过即时访问功能信息，在每次共聚焦实验中探索信息的新维度。
不需要的荧光信号会掩盖数据，让您无法获取真正的样品信息，通过去除这些荧光信号可以提高图像质量。
根据寿命信息对荧光进行分类，让您区分光谱相近的荧光信号。
徕卡共聚焦课堂第15讲：斑马鱼大脑高分辨率全器官成像
2021年12月24日 10:06
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第15讲：斑马鱼大脑高分辨率全器官成像
结构信息是理解复杂生物系统的关键，而脊椎动物的中枢神经系统是最复杂的生物结构之一。要想从发育中的斑马鱼身上分离出一个完整的大脑，我们需要覆盖大约10平方毫米的区域，深度在毫米范围内。通常，低倍透镜不能提供足够的分辨率来揭示神经组织中复杂结构之间的相互作用。此外，由于散射过程，使用共聚焦显微镜在致密生物组织内成像深度通常限制在大约10微米。
徕卡共聚焦讲堂第14讲：通过3D成像和对亚细胞进行色素鉴定描述罗马地下墓穴光合生物膜的特征
2021年12月23日 17:59
类型技术前沿
徕卡共聚焦讲堂第14讲：通过3D成像和对亚细胞进行色素鉴定描述罗马地下墓穴光合生物膜的特征
人工照明会诱导光合生物膜（黄萎病或maladie verte）的失控生长，从而损坏地下遗迹。为了防止罗马地下遗迹（意大利罗马的St.Callistus和St. Domitilla地下墓穴）发生生物退化或外观损害，人们使用基于荧光光谱法的共聚焦技术来分析单个细胞的荧光色素。该研究可在体内色素识别、生物体形态和生物膜内具有特定荧光特征的细胞的3D定位之间建立同步关系。该技术可比较用绿光(GL)和白光(WL)照射光合生物膜的效果。结果显示在GL的情况下生物膜生长迟缓，表明其可用于文化遗址的照明。
徕卡共聚焦课堂第13讲：声光调制在全光谱型激光共聚焦显微镜系统的应用
2021年12月23日 17:26
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第13讲：声光调制在全光谱型激光共聚焦显微镜系统的应用
荧光最显著的特征是照射光（激发光）和检测光（发射光）颜色之间的偏移，称为斯托克斯位移。因此，在荧光成像中，不仅要将激发光和发射光的相应波长过滤出来，还需要将激发光从发射光中分离。过去，通常用平面光学元件，包括灰色或彩色滤光片和反射镜进行滤光和分光。虽然有多种平面光学元件可供使用，但固定的规格和低切换效率使其在使用上具有局限性，并且采用不同角度或梯度的涂层作为激发光和发射光的调谐方法也被证实并不可行。现在可以采用全新的技术即使用声光可调谐滤波器()控制激发光，用声光分光器()对激发光、发射光进行分光，可以对激发光和发射光进行自由调谐和高速切换。
徕卡共聚焦课堂第12讲：光谱检测-如何设定特定探针发射光的光谱检测范围
2021年12月23日 16:40
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第12讲：光谱检测-如何设定特定探针发射光的光谱检测范围
为了拆分多色成像的发射光谱，首先由分束器或色散元件将不同颜色的光引入到不同的方向[1]，带通滤片则能够最大限度地减少串色，并抑制所有残留的激发光，最终到达传感器。在过去，常使用的滤片是普通的玻璃带通滤片。如今，一项革命性的设计诞生了，那就是在多波段组件（探测器）中使用光度计滑块。该设计可以极为有效地探测发射光，同时提供完全可调谐性，与此同时带来的好处是使光谱扫描成为了可能。使用白激光作为光源时，可调谐光谱检测器是唯一与可调谐光源光谱自由度匹配的设备。其他的光谱检测设备使用一系列检测元件，其波段是固定的，但它们不可调谐，灵敏度较低。
徕卡共聚焦课堂第11讲：荧光寿命成像与荧光共振能量转移
2021年12月23日 16:01
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第11讲：荧光寿命成像与荧光共振能量转移
体内生化定量
荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。
FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。 FLIM的典型应用是FLIM-FRET。FRET是研究分子相互作用的成熟技术。它能用来研究蛋白质结合并在埃的尺度上估算分子间的距离。
徕卡共聚焦课堂第10讲：无标记荧光寿命成像
2021年12月23日 15:32
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第10讲：无标记荧光寿命成像
生理学条件下的显微镜成像
很多生物样品都会产生自发荧光。它的光谱往往很宽，会干扰荧光标记。本应用指南论述了自发荧光如何作为荧光寿命成像显微镜(FLIM)中的内在对比度，从而产生多色图像。此外还概述了如何将光谱成像与荧光寿命信息相结合，以区分进而识别生物样品中的不同荧光组分。
活细胞成像简介
2021年12月23日 15:23
类型技术前沿
活细胞成像简介
了解复杂且快速变化的细胞动力学是深入探索生物进程的重要一步。因此，现代生命科学研究越来越需要关注于在分子水平上实时发生的生理事件。
观察和分析活细胞时面临的挑战
在固定细胞或组织中，获取样品“分子状态”的信息已是一项艰巨的任务。如果需要获取实时信息，，就必须尽可能在实验过程中保证细胞自然地运行生理机制，因此将加大实验的困难程度。此外，由于很多生理过程的持续时间仅有几秒甚至几毫秒（例如细胞内离子水平的变化），必须在相对较短的时间内采集大量信息。
