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徕卡共聚焦课堂第9讲：如何利用自适应反卷积提取图像信息
2021年12月23日 14:45
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第9讲：如何利用自适应反卷积提取图像信息
共聚焦激光扫描显微镜是真正三维分辨荧光成像的标准。快速光学切片采用灵活的扫描策略，结合同时多色、高灵敏度和低噪声信号检测，在空间和时间域提供了最大的分辨率。结合现代的图像信息提取方法，有助于研究者从获取的图像中挖掘尽可能多的信息。图像信息提取是指利用图像系统的先验知识进行图像增强的智能过程。从简单的眩光控制和光学开发到智能和巧妙的模型提取，有许多方法可以看到图像之外的信息。
徕卡共聚焦课堂第8讲：无限远光学系统
2021年12月23日 11:28
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第8讲：无限远光学系统
“无限远光学”这一概念是指在显微镜的物镜和镜筒透镜之间具有平行光线的光束路径。平面光学元件可以进入到这个“无限远空间”中，而不影响成像，这对于利用DIC或荧光等对比度方法至关重要。
现代显微技术需要在无限远光路中添加多种光学仪器，如光源或激光装置。满足这一需求的不同方法已经出现，本文对其进行了描述。
徕卡共聚焦课堂第7讲：活细胞成像技术知识点
2021年12月23日 10:59
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第7讲：活细胞成像技术知识点
可视化生命分子动力学
理解复杂和/或快速的细胞动力学是探索生物过程的重要一步。因此，当今的生命科学研究越来越关注实时动态过程，如细胞迁移，细胞、器官或整个动物的形态变化以及活体标本的实时生理（例如细胞内离子组分的变化）事件。解决这些挑战性需求的一种方式是采用被统称为活细胞成像的光学方法。活细胞成像可研究活细胞的动态过程，而非提供细胞当前状态的“快照”——它把快照变成了电影。活细胞成像可提供单个细胞、细胞网络（原位）甚至整个生物体（体内）中动态事件的空间和时间信息。这些特点让活细胞成像成为解决细胞生物学、癌症研究、发育生物学和神经科学问题的必要技术。
徕卡共聚焦课堂第6讲：光谱成像
2021年12月23日 10:16
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第6讲：光谱成像
多通道荧光成像的目的是将各种荧光染料发射的光子收集到独立的检测通道中。为此，有必要对全发射光谱的组分进行空间分离，即将这些组分定位到不同的方向。传统上，这种分离是通过“次级二向色镜”（将照明与发射分离的主要分光器，称“主分光器”）进行的。出乎意料的是，还可以通过使用棱镜（首选）或光栅来分离。根据光子的颜色对光子进行物理分类，这是一种原始的真彩分色方法。如果主要分色不充分，则可以通过数学分解来补充。
徕卡共聚焦课堂第5讲：荧光和量子点的基本原理和发展历史
2021年12月22日 17:46
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第5讲：荧光和量子点的基本原理和发展历史
在您的科研生涯的某个时候，都有可能会用到荧光显微镜。这种无处不在的技术改变了显微镜学家对研究对象进行成像、标记和追踪的方式，不论是整个生物体，还是单个蛋白质等等。
通过本文，我们将探讨什么是“荧光”，包括其定义背后的历史和基础物理原理，绿色荧光蛋白（GFP）的发现和应用，并展望量子点等荧光探针不断扩大的应用领域。
徕卡共聚焦课堂第4讲：荧光寿命-一个适当的选择
2021年12月22日 17:15
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第4讲：荧光寿命-一个适当的选择
荧光过程提供了两个用于成像的测量参数：强度和荧光寿命。荧光寿命是指分子停留在激发态的时间。可以通过观察足够大量的激发-发射事件集合来测量荧光染料的典型寿命。我们可以测量图像中所有像素的典型寿命，并将这些数字记入数组元素。那就是荧光寿命成像[1](FLIM，也称为τ-映射）。典型的荧光寿命范围在0.2到20纳秒之间。
徕卡共聚焦课堂第3讲：光路篇
2021年12月22日 16:48
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第3讲：光路篇
共聚焦显微镜是指一类可以记录光学切片的特殊光学显微镜。
通过照亮和观察单个衍射极限点，在激光共焦系统中实现光学切片。这需要两个光束段焦点一致，因此是“共焦的”。与宽场图像相反，共聚焦图像没有散焦模糊情况。这本身就是一个优势，因为样品深层的图像显示清晰，细节丰富。然而，最重要的优势是其具有微观特征的三维可视化潜力。沿三维（z-stack）采集图像序列后，由计算机重建和显示三维物体。
徕卡共聚焦课堂第2讲：激发篇
2021年12月22日 16:06
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第2讲：激发篇
荧光的激发需要特定颜色的光：既要有效地激发探针（波长接近探针激发光谱的最大值），又要留下足够的空间收集发射光而不会进入检测器的光路中。在共聚焦显微镜中，通常使用多谱线激光器或激光电池作为激发光源，这需要设备既能够自由选择适合当前实验所用荧光团的激发谱线又能够控制该激发谱线的强度因为直接在光源处控制强度时，大多数激光器会出现噪音增强的现象。AOTF（声光可调滤光器）的引入简化了滤光过程，同时显着提高了实验的灵活性。AOTF对于耦合白激光源是唯一的明智选择。
徕卡共聚焦课堂第1讲：针孔几何形状：完美的四边形
2021年12月22日 15:28
类型技术前沿
徕卡共聚焦课堂第1讲：针孔几何形状：完美的四边形
共聚焦成像的光学切片要求在光路发射部分的场共轭平面上有一个小孔。在最简单的情况下，这个孔径为圆形，允许透射出照亮孔径的艾里衍射图案的中心部分。孔径大小应该刚好可以通过该图案（“艾里斑”）的内圈。因此，孔径的正确大小取决于波长和物镜的数值孔径，因为这些参数也定义了中间像平面中的（放大）衍射图案。
为了适应不同的颜色和分辨率，检测针孔应该可变。要获得精确的圆形孔径，这意味着在机械设备上提供一组孔径，以便在需要时可以改变大小。大多数共聚焦显微镜使用一种可调谐针孔代替，通常为双叶片“虹膜”。因此，孔径不是圆形，而是矩形（正方形）。
徕卡多光子显微镜免疫学应用：揭示巨噬细胞发挥血小板功能的机制
2021年12月07日 15:08
类型技术前沿
徕卡多光子显微镜免疫学应用：揭示巨噬细胞发挥血小板功能的机制
高端仪器之所以受到顶尖科学家们的青睐，不仅因为它们在日常使用中表现出的稳扎稳打，还因为其在捕捉关键性创新实验结果时带来的无限可能。今天，我们通过解读加拿大卡尔加里大学（University of Calgary）的徕卡多光子显微镜用户近期在《Science》杂志上发表的题为“Primordial GATA6 macrophages function as extravascular platelets in sterile injury”的研究论文[1]，感受一下徕卡DIVE（Deep In Vivo Explorer）多光子显微镜在体成像的“速度与激情”。
